实验方法: 1.多代连续饮用四种饮水的动物模型 F0代:断乳SD雌鼠120只/雄鼠60只,均随机分为自来水组(Tap water,T组)、天然水组(Natural water,N组)、矿物质水组(Mineralized water,M组)、纯净水组(Purified water,P组)四组,每组30(雌性)/15(雄性)只。饮水至4月龄开始繁殖实验,雌雄2:1比例交配,产生约20只受孕F0代雌鼠。雄鼠处死,孕鼠保留至生产F1代仔鼠。 F1代:各组F1代雌仔鼠30只,雄仔鼠15只。饮用与F0代相同饮水至4月龄,雌雄2:1比例交配,产生约20只受孕F1代雌鼠。雄鼠处死,孕鼠保留至生产F2代仔鼠。 F2代:各组F2代雌仔鼠30只,雄仔鼠30只,与F1代相同饮水,采用饮水瓶给水,除饮水外其他条件完全相同,每日早上8点定时更换饮水和添加饲料。 自来水源于重庆城市供水系统,天然水、矿物质水、纯净水均采用市售相同批次的瓶装饮用水。四种饮水经检测均符合相应水质标准。 2.取材和指标 饲喂期间,①每日观察各组动物的外观和行为,包括动物的饮食情况、精神和活动状况、毛发润泽度及排泄物情况等。②每月称量体重1次。③每月测定1次大鼠的24h饮水、摄食量。 饲喂F2代大鼠至10月龄处死。采集腹主动脉血,一部分用血气分析仪检测机体酸碱状态指标,另一部分分离血清,用自动生化分析仪检测肝肾功能指标和用酶联免疫试剂盒测定骨代谢指标。采血后立即剖取雄鼠心、肝、主动脉弓,将器官周围的脂肪结缔组织去除,并将脏器表面血液吸干净,用电子天平称重,计算脏器系数,脏器系数以脏器重量(g)与体重(g)之比表示。同时雌鼠取右侧股骨、胫
骨和门齿,剔除肌肉和软组织,用生理盐水浸湿的纱布包裹后,再用锡箔纸包裹,置于-20℃低温冰箱保存,实验前24h取出标本,放置室温下解冻。股骨用于骨密度和生物力学检测,胫骨和门齿检测其中钙、镁、磷含量。 3.统计学分析 数据经SPSS13.0统计软件处理,实验数据均以均数±标准差((?0±s)的形式表示,组间均数差异的显著性比较采用单因素方差分析。
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